碧云天的质粒中量抽提试剂kit盒(通用型) (Plasmid Midi Preparation Kit for All Purpose, Plasmid Midiprep Kit for All Prupose)是一种用于从大肠杆菌中进行中量质粒抽提的通用型离心柱式试剂kit盒。
本试剂kit盒不仅适用于常用的EndA^-菌株DH5α、JM109和XL-1 e等，也适用于EndA⁺菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等，能避免EndA⁺菌株中高丰度核酸酶的污染，并适用于从糖类修饰水平高的野生菌株中提取质粒。
野生型大肠杆菌中表达Endonuclease I，能切割并降解双链DNA。编码Endonuclease I的基因是endA，如果endA突变失活，其基因型会被标注为endA1，相应的突变菌株被称为EndA^-菌株，而野生型菌株则被称为EndA⁺菌株。常见的EndA^-和EndA⁺菌株参见附表1。从EndA⁺菌株中抽提的质粒，微量核酸酶和质粒结合而容易被共纯化，导致容易降解，而本试剂kit盒增加了特殊的洗涤步骤(核酸酶洗涤液溶液PB洗涤)，可以避免EndA⁺菌株中抽提获得的质粒容易降解的问题(参考图1)。

图1. 使用溶液PB可以使从EndA⁺菌株JM110中抽提的质粒不易降解，而对于EndA^-菌株DH5α中抽提的质粒没有影响。使用本试剂kit盒时，如上图所示，在使用和不使用溶液PB时的质粒得率一致。但对于EndA⁺菌株JM110，不使用溶液PB时从其中抽提获得的质粒在内切酶缓冲液Buffer Y中37℃孵育1小时后会全部降解，而使用溶液PB时同样孵育1小时就不会降解。对于EndA^-菌株DH5α无论是否使用溶液PB，抽提获得的质粒的都很稳定。

本试剂kit盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的纯化。无需酚氯抽提，无需乙醇沉淀，12个样品只需不足60分钟即可完成。
无需高速冷冻离心机，只需普通台式高速离心机。所有操作均可在1.5ml离心管中完成。
每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为50微克。每个纯化柱可用于抽提5-10毫升用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD260和OD280比值也会因菌种不同等原因而略有波动。
本试剂kit盒抽提所得到的质粒可直接用于转染细胞，DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化tissue，内切酶消化等。本试剂kit盒在使用溶液PB的情况下，获得的质粒的纯度更高，总体上转染细胞的效率会显著提高。
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