人17羟皮质类固醇(17-OHCS)elisa试剂盒标本要求

1.血清:室温血液自然凝国10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应

再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合1020分钟后,离心20分钟左右(20003000转分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心

3尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸

腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转分)。仔细收集上清。检测细胞内

的成份时,用PBs(PH72-74)稀释细胞是液,细胞浓度达到100万m左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内

成份。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH74。用液迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃C

的温度。加入一走量的PBS(PH74),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转分)。仔细收集

上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于20℃保

存,但应避免反复冻融

7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

四、人尿17羟皮质类固醇17 HCSELISA检测试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4C

2设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50uL

3样本孔中加入待测样本50μ;空白孔不加

4除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物醇(HRP)标记的检测抗体100uL,用封板膜封住反应孔,37C

水浴锅或恒温箱温育60min。

5弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也

可用洗板机洗板

6每孔加入底物AB各50μL,37℃避光孵育15min。

7每孔加入终止液50μ,15mn内,在450nm波长处测走各孔的oD值。