测定原理:
       PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和二氧化碳生成草酰乙酸和磷酸氢离子，苹果酸脱氢酶进一 步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，从而计算PEPC 活性。

自备仪器用品
       台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制
提取液 60ml×1瓶, 4°C保存
试剂一 30ml×1瓶，4°C保存
试剂二 10ml×1瓶，4°C保存
试剂三 粉剂×1支，-20°C保存，临用前加8ml蒸馏水充分溶解，用不完的试剂4°C保存一周
试剂四 粉剂×1支，-20°C保存，临用前加5ml蒸馏水充分溶解，用不完的试剂4°C保存一周
试剂五 20μl原液×1支，4°C保存
试剂五 10ml稀释液×1瓶，4°C保存

样品前处理
       样本提取详见试剂盒内说明书。测定细菌、组织和细胞时需要测定蛋白浓度。

测定步骤
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长到340nm，用蒸馏水调零。
2、试剂五工作液的配置：将试剂五原液：试剂五稀释液=1:329稀释，用多少配多少。
3、将试剂一、二、三、四和试剂五工作液置于37°C（哺乳动物）或25°C（其他物种）预热5分钟。
4、加样表:

       将上述试剂按照顺序加入1ml石英比色皿中，立即混匀，加样本的同时开始计时，记录在340nm波长下的初始吸光度A1和5分钟后的吸光度A2，计算△A =A1-A2。