产品应用——18种氨基酸的分离

流动相：0.1mol/L醋酸钠溶液(pH 6.50):乙腈＝93:7
     水:乙腈＝20:80

柱温：40℃

检测器型号：UV(紫外光检测器)

流动相的配制

色谱柱：PolyPak AminoAcid 4.6×250mm×5μm

流动相A： 0.1mol/L醋酸钠溶液(pH 6.5):乙腈＝93.0:7.0

配制方法：准确称取三水合醋酸钠13.6g于1000mL水中，搅拌均匀，使之溶解，用冰醋酸或氢氧化钠溶液调pH值至6.50；准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液930mL和乙腈70mL，混合均匀，抽滤过0.22μm滤膜；

流动相B：水:乙腈＝20.0:80.0

配制方法：准确量取水200mL和乙腈800mL，混合均匀，抽滤过0.22μm滤膜；

衍生化反应

1. 对照品溶液浓度值

2.供试品溶液制备

精密量取/称取供试品适量，并配制成相应浓度的溶液备用。

3.衍生步骤

1)分别将A、B两种衍生试剂用稀释剂稀释至原来浓度的1/5倍；

2)精密量取上述对照品溶液160μL，置于试管中，加入稀释后的A溶液100μL和稀释后的B溶液100μL，摇匀，室温反应60min；然后加入正己烷溶液400μL旋紧盖子后振摇5～10s，室温静置分层，取下层200μL溶液，加入800μL水混合均匀，再取200μL加入800μL水混合均匀，用孔径为0.22μm有机膜过滤，待分析；

3)供试品的衍生步骤与对照品相同，样品衍生后稀释体积可根据样品中氨基酸含量适当稀释。

(注意：供试品样品前处理采用酸解提取，需要在衍生之前进行酸挥干处理，供试品中酸性强度过大在衍生过程中会发生中和，衍生过程必须在碱性条件下，才能够起到衍生化完全。)